DOCUMENTO
TÉCNICO
PNT-RTP-01
RECOGIDA, TRANSPORTE Y PROCESAMIENTO
GENERAL DE LAS MUESTRAS EN EL LABORATORIO DE
MICROBIOLOGÍA
| ELABORADO |
REVISADO
Y APROBADO
Jefe de Servicio |
| Nombre/Firma |
Fecha |
Nombre/Firma |
Fecha |
|
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| EDICIÓN |
FECHA |
ALCANCE
MODIFICACIONES |
01
|
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Edición
inicial |
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COPIA
REGISTRADA Nº..........ASIGNADA
A..........................
Este documento es propiedad del Servicio de Microbiología
del Hospital .......……………….
.................
La información en él contenida no podrá
reproducirse total ni parcialmente sin autorización
escrita del Responsable de su elaboración. Las copias
no registradas no se mantienen actualizadas a sus
destinatarios. |
|
1.
PROPÓSITO Y ALCANCE
El
propósito de este procedimiento es establecer las directrices
para asegurar la calidad de la fase preanalítica en lo que
afecta tanto a la recogida como al transporte de las muestras hasta la
llegada al laboratorio de microbiología previo al
procesamiento. Asimismo, este procedimiento establece las directrices
del procesamiento inicial de la muestra de una manera general, una vez
recibida en el laboratorio.
Este procedimiento es aplicable a todos los laboratorios de
hospitales, centros de salud o cualquier laboratorio que realice
determinaciones de microbiología clínica.
2.
FUNDAMENTO
Todo
el trabajo de un laboratorio de microbiología se convierte en
inútil si las muestras clínicas que se reciben para el
diagnóstico no son de calidad, es decir, no están
correctamente recogidas y transportadas al laboratorio en las
condiciones adecuadas para la determinación que se solicita. El
laboratorio de microbiología debe proporcionar esta información
a los servicios solicitantes para que tanto la recogida como el
transporte y la conservación se hagan de manera apropiada.
3.
DOCUMENTOS DE CONSULTA
-
Seguridad en el laboratorio de microbiología clínica
(Procedimiento 10). Procedimientos en microbiología clínica.
Recomendaciones de la SEIMC. Coordinadora Elena Loza Fernández
de Bobadilla. 2000.
-
Procedimientos específicos para cada tipo de técnica
4.
MUESTRAS
- En
la tabla 3 se puede
consultar con más detalle la muestra de elección para
cada determinación microbiológica, recipientes,
transporte y conservación de cada muestra. Como reglas
generales cabe indicar las siguientes:
- 1.
Antes de recoger la muestra, considerar el riesgo/beneficio de la
recogida de la muestra para el paciente.
- 2.
La muestra debe transportarse en envases adecuados con cierres a
prueba de fugas (ver tablas 4
y 5). La recogida de la
muestra deberá realizarse en condiciones de máxima
asepsia, evitando contaminaciones ambientales del personal y del
propio enfermo a la muestra y viceversa.
- 3.
La muestra debe etiquetarse con el nombre del paciente, el servicio
solicitante, el tipo de muestra y la fecha de recogida. En
determinados casos será importante precisar la hora de
recogida.
- 4.
Se recomienda que cada muestra se introduzca en una bolsa de plástico
que a su vez se introducirá en otra donde se incluya el
volante. Así se evita que los posibles derrames de la muestra
invaliden el volante de petición.
- 5.
Se debe recoger una cantidad de muestra adecuada a la petición
(ver tabla 6). En
ocasiones una escasa cantidad de muestra puede ser la causa de
falsos negativos.
- 6.
El material destinado a cultivo no debe estar en contacto con
sustancias desinfectantes o anestésicas, siempre que sea
posible.
- 7.
La muestra se debe recoger, siempre que sea posible, antes de
iniciar cualquier terapia antimicrobiana.
- 8.
Se debe evitar, siempre que sea posible, el contacto de la muestra
con microbiota normal del paciente, con el objeto de asegurar que la
muestra refleje lo mejor posible el lugar de la infección.
- 9.
El envío al laboratorio de microbiología debe ser lo más
rápido posible con objeto de asegurar la supervivencia de
microorganismos de difícil crecimiento y de evitar el
sobrecrecimiento de la microbiota normal, acortar el tiempo de
contacto con anestésicos locales o con otras sustancias con
acción antimicrobiana utilizadas en la recogida de la
muestra.
Tabla 3.- Transporte y conservación de muestras para diagnóstico
microbiológico
| Muestra |
Determinación |
Envases |
TRANSPORTE
Tiempo y temperatura |
CONSERVACIÓN
Tiempo y temperatura |
|
Abscesos/heridas
quemaduras/mordeduras |
Bacterias
|
Envase
para anaerobios (pref.) o jeringa sin aguja (pref.).
Una
para Gram, otra para cultivo (Amies/Stuart) |
<2
h, TA |
<24
h, TA |
| |
Hongos
|
Estéril
(pref.)/Torunda.
Una
torunda para tinción, otra para cultivo (Amies/Stuart) |
<2
h, TA |
<24
h, TA |
| |
Virus |
Torunda
seca¹ |
Transferir
a TV,
<24 h, 2-8°C |
+24
h, -60/-80ºC |
| Biopsias |
Bacterias/Hongos |
Estéril |
<15
min, TA |
<24
h, TA |
| |
Virus |
Estéril |
Transferir
a TV,
<24 h, 2-8°C |
+24
h, -60/-80ºC |
| Catéter/material
protésico |
Bacterias/Hongos |
Estéril |
<15
min, TA |
<24
h, 2-8°C |
| Catéter
urinario |
No
es aceptable |
|
|
|
| Catéter
drenaje |
No
se recomienda |
Enviar
líquido drenaje/
abscesos/aspirados |
|
|
|
Genital
(Secreción prostática) |
Bacterias/Hongos |
Estéril |
<2
h, TA |
<24
h, TA |
| Genital
(cervical/uretral/rectal) |
Chlamydia
trachomatis |
Medio
transporte clamidia (cultivo).
Torunda seca (fluorescencia) |
Inoculación
inmediata |
|
| Genital
(cervical/rectal/uretral) |
Bacterias
(gonococo) |
Inoculación
directa sobre medios de cultivo
Torunda con medio transporte |
<2
h, TA |
<24
h, TA |
|
Genital
(líq. amniótico) |
Bacterias/Hongos |
Transporte
de anaerobios |
<15
min, TA |
<24
h, TA |
|
Genital
(úlcera) (cualquier localización) |
Virus |
Torunda
seca¹ |
Transferir
a TV,
<24 h, 2-8°C |
+24
h, -60/-80ºC |
|
Genital
(semen) |
No
se recomienda |
|
|
|
|
Genital
(úlcera) (cualquier localización) |
Treponema
pallidum |
Campo
oscuro |
Inmediata
visualización |
|
| Genital
(Uretral) |
Mycoplasma
hominis
Ureaplasma urealyticum |
Torunda
de dacrón |
Inocular
en medio transporte de micoplasmas |
<8
h, TA
<36 h, 2-8°C |
| Genital
(vaginal) |
Bacterias/Hongos |
Torunda
con medio transporte (cultivo)
Torunda seca para Gram |
<2
h, TA |
<24
h, TA |
| Heces |
Bacterias |
Estéril
con Cary Blair |
<2
h, TA |
<24
h, 2-8°C |
|
Clostridium
difficile |
Estéril |
<1
h, TA |
48
h, 2-8°C para cultivo |
|
|
|
1-24
h, 2-8°C |
72
h, 2-8°C (citotoxina) |
|
|
|
>24
h, -20°C |
+72
h, -60/-80°C (citotoxina) |
|
Parásitos |
Transporte
con SAF, FOR + PVA, MIF + PVA |
Indefinido,
TA |
Indefinido,
TA |
| |
Rotavirus |
Estéril |
2-8°C |
|
| Heces/Rectal |
Virus |
Torunda
seca¹ |
Transferir
a TV,
<24 h, 2-8°C |
+24
h, ºC |
|
Jugo
gástrico |
Bacterias/Hongos |
Estéril |
<2
h, 2-8°C |
<24
h, 2-8°C |
| |
Micobacterias |
Estéril |
<15
min, TA o neutralizar en
la 1ª hora de la recogida |
<24
h, 2-8°C |
|
Lesiones
fúngicas (piel, pelo, uñas) |
Hongos |
Inoculación
directa sobre medios de cultivo |
<24
h, TA |
|
|
Líquidos
estériles |
Bacterias |
Estéril/botellas
de hemocultivos /transporte para anaerobios |
<15
min, TA |
<24
h, TA |
| |
Hongos |
Estéril |
<15
min, TA |
<24
h, 2-8°C |
| |
Virus |
Estéril |
<15
min, 2-8°C |
<72
h, 2-8°C |
| |
Serología |
Estéril |
<15
min, TA |
<24
h, 2-8°C |
| |
Parásitos |
Estéril |
<15
min, TA |
<24
h, TA |
| Médula
ósea |
Bacterias/Hongos |
Estéril/botellas
de hemocultivos |
<24
h, TA |
<24
h, TA |
| |
Parásitos
(Leishmania) |
Estéril |
<2
h, TA |
<2
h, TA |
| |
Virus |
Estéril |
Transferir
a TV, <24 h, 2-8°C |
+24
h, -60/-80ºC |
| Ocular
(Conjuntival) |
Bacterias/Hongos |
Torunda
con medio de transporte |
<2
h, TA |
<24
h, TA |
|
Ocular
(Raspado corneal) |
Bacterias/Hongos |
Inoculación
directa en medios de cultivo |
<15
min, TA |
<24
h, TA |
| Ocular
|
Virus |
Torunda
seca¹ |
Transferir
a TV,
<24 h, 2-8°C |
+24
h, -60/-80ºC |
| Oído
externo |
Bacterias/Hongos |
Torunda
con medio de transporte |
<2
h, TA |
<24
h, 2-8°C |
| Oído
interno |
Bacterias/Hongos |
Torunda
con medio de transporte
Transporte
para anaerobios
Tubo
estéril |
<2
h, TA |
<24
h, TA |
|
Orina |
Bacterias/Hongos |
Estéril
Tubos
con conservante (ác. bórico-formiato sódico) |
<2
h, TA (sin conservante)
<24
h, 2-8°C (con conservante) |
<24
h, 2-8°C |
| |
Virus |
Estéril |
<24
h, 2-8°C |
|
| |
M.
hominis/
U.
urealyticum |
Estéril |
Inocular
en medio transporte de micoplasma |
<8
h, TA |
|
|
|
|
<36
h, 2-8°C |
| |
Leptospira |
Estéril |
<1
h, TA |
|
| |
Parásitos |
Estéril |
<2
h, TA |
<24
h, 2-8°C |
| |
Antígeno
Legionella |
Estéril |
<2
h, TA |
<24
h, TA
<24,
2-8°C
+14
d, -20°C |
| |
Antígeno
de neumococo |
Estéril |
<2
h, TA |
<24
h, TA
<24,
2-8°C
+14
d, -20°C |
| Orina
suprapúbica |
Bacterias |
Transporte
para anaerobios |
<2
h, TA |
<24
h, 2-8°C |
| Rectal |
Bacterias |
Torunda
con medio de transporte |
<2
h, TA |
<24
h, TA |
| Sangre |
Hemocultivo |
Botellas
de hemocultivos |
<2
h, TA |
<24
h, TA |
| |
Serología |
Suero
|
<24
h, 2-8°C |
+24h,
-20°C |
|
|
Plasma
(no válido si hay que inactivar) |
|
+24h,
-60/-80°C (no varias descongelaciones) |
| |
Virus |
Plasma
(con
EDTA para técnicas moleculares) |
<2
h, TA |
|
| |
Carga
vírica VIH |
Plasma
(nunca heparina) |
<2
h, TA |
<72
h, -20-°C
+72h,
-60/-80°C |
| |
Cultivo
Leishmania |
Sangre
no coagulada (con heparina pref.) |
<15
min, TA |
|
| |
Parásitos |
Sangre
no coagulada (con EDTA) |
<15
min, TA |
|
|
Tracto
respiratorio superior (sinusal) |
Bacterias
|
Transporte
para anaerobios/Estéril
|
<15
min, TA |
<24
h, TA |
|
Hongos |
Estéril |
|
|
|
Tracto
respiratorio superior (faríngeo) |
Bacterias/Hongos |
Torunda
con medio de transporte |
<2
h, TA |
<24
h, TA |
| Tracto
respiratorio superior (faríngeo) |
Antígeno
S. pyogenes |
Torunda
seca (Dacrón/algodón) |
<2
h, TA |
<72
h, 2-8°C |
| |
Virus |
Torunda
seca¹ |
Transferir
a TV,
<24
h, 2-8°C |
+24
h, -60/-80ºC |
|
Tracto
respiratorio superior (nasal) |
Bacterias/Hongos |
Torunda
con medio de transporte |
<2
h, TA |
<24
h, TA |
| |
Bacterias/Hongos |
Torunda
con medio de transporte |
<2
h, TA |
<24
h, TA |
| |
Virus |
Torunda
seca¹ |
Transferir
a TV,
<24
h, 2-8°C |
+24
h, -60/-80ºC |
|
Tracto
respiratorio superior (nasofaríngeo) |
Bordetella
pertussis |
Torunda
seca de alginato |
Inmediato/2-8°C |
|
|
Tracto
respiratorio inferior²/esputo |
Bacterias/Hongos |
Estéril |
<2
h, TA |
<24
h, 2-8°C |
| |
Virus |
Estéril |
Transferir
a TV,
<24
h, 2-8°C |
+24
h, -60/-80ºC |
¹Para
virus: Se aceptan torundas de algodón, dacrón o rayón
con bastón de aluminio o plástico. No aceptar torundas
de alginato o con bastón de madera.
²Muestras del tracto respiratorio inferior: aspirado
bronquial, lavado broncoalveolar, cepillado por telescopado, aspirado
traqueal, punción transtorácica aspirativa con aguja
ultrafina.
Abreviaturas:
TA: temperatura ambiente, TV: medio de transporte de virus; SAF:
acetato sódico-formalina, FOR: 10% formalina, MIF:
mertiolato-ioduro-formalina; pref.: preferentemente.
Tabla
4.- Sistemas de transporte para la investigación de
microorganismos aerobios
| Sistema
de transporte |
Comentarios |
|
Torundas
con medio de transporte |
Torundas
en tubos de plástico con medio de transporte que mantiene un
pH favorable y previene la desecación de la muestra. |
|
Torundas
de alginato cálcico |
Útiles
para la investigación de Chlamydia spp. y Bordetella
spp.
Pueden ser tóxicas para N. gonorrhoeae, U.
urealyticum y virus. Útiles para la toma de muestra de
conexiones de catéteres intravasculares. |
|
Torundas
de dacrón |
Útiles
para la investigación de virus |
|
Torundas
de algodón |
Pueden
inhibir a Chlamydia spp. Cuando la torunda es de madera,
puede inactivar a virus del grupo Herpes e interferir con las
pruebas de identificación de Ureaplasma. |
|
Torundas
para exudados nasofaríngeos |
Torundas
flexibles que emplean alambre en lugar de madera |
|
Tubos
estériles de boca ancha |
Útiles
para el transporte de orinas, esputos, broncoaspirados, lavados
broncoalveolares, heces, biopsias. |
|
Tubos
estériles |
Líquidos
estériles, catéter telescopado, aspirados de abscesos
y heridas |
|
Tubos
estériles con medio de transporte o conservante |
Tubo
estéril con medio de transporte (Cary Blair) para enteropatógenos
en heces.
Tubo
con fijador (alcohol polivinílico) para parásitos en
heces.
Tubo
con conservante (ácido bórico–formiato de sodio)
para orinas. Mantiene la población bacteriana durante 48 h a
temperatura ambiente sin necesidad de refrigeración. |
|
Placas
de Petri estériles |
Útiles
para pelos, escamas cutáneas y uñas |
Tabla 5.- Sistemas de transporte para la investigación de
microorganismos anaerobios
|
Sistema
de transporte |
Comentarios
|
|
Torundas
con sistemas de transporte específicos para anaerobios |
|
|
Viales
y tubos con atmósfera anaerobia |
Contienen
un medio de transporte semisólido con un agente reductor y
un indicador. Cualquier coloración azul de dicho medio
indica exposición al aire. |
|
Bolsas
de anaerobiosis |
La
muestra se introduce en el interior de una bolsa impermeable en
cuyo interior se introduce un catalizador y un generador de hidrógeno
y CO2.
|
|
Jeringa
para la obtención de aspirados |
Cuando
no se dispone de ninguno de los sistemas anteriores o bien la
cantidad de muestra es mínima, puede utilizarse la misma
jeringa con la que se ha obtenido. Para ello hay que eliminar el
aire y taponar la aguja con un tapón de goma. |
Tabla
6.- CONSIDERACIONES SOBRE LA TOMA DE LAS MUESTRAS
1.
Consideraciones sobre la toma de las muestras del sistema nervioso
central
|
Cultivo
|
Volumen
mínimo recomendado (ml) |
Comentarios |
|
Bacterias |
1 |
Enviar
el tubo mas turbio |
|
Hongos |
2 |
Descartar
Cryptococcus spp. |
|
Micobacterias |
2 |
|
|
Anaerobios |
2 |
Abscesos
y biopsias |
|
Parásitos |
2 |
Abscesos
o biopsias. Naegleria spp. y Acantamoeba spp.
también en LCR. |
|
Virus |
1-2 |
|
2.-
Consideraciones sobre los líquidos estériles
|
Cultivo
|
Volumen
(ml) |
Comentarios |
|
Bacterias |
1-5 |
Especificar
sospecha de artritis gonocócica |
|
Hongos |
>
10 |
|
|
Micobacterias |
>
10 |
|
|
Anaerobios |
1-5 |
Usar
un medio de transporte con anaerobiosis |
3.-
Consideraciones sobre las muestras del tracto respiratorio
|
Cultivo
|
Volumen
(ml) |
Comentarios |
|
Bacterias |
No
aplicable |
Especificar
sospecha de Legionella |
|
Hongos |
3-5 |
Esputos,
broncoscopias, aspirados y biopsias pulmonares |
|
Pneumocystis
jiroveci |
2 |
Esputo
inducido, lavado broncoalveolar o biopsia pulmonar |
|
Micobacterias |
5-10 |
Esputo,
broncoscopia, aspirados y biopsias pulmonares |
|
Anaerobios |
1 |
Aspirado
sinusal, timpanocentesis, aspirados y biopsias pulmonares |
|
Parásitos |
3-5 |
Amebas,
huevos de helmintos, larvas de Echinococcus, Ascaris
y Strongyloides spp. |
4.
Consideraciones sobre las muestras oculares
|
Cultivo
|
Comentarios |
|
Bacterias |
Inocular
los medios directamente |
|
Hongos |
Inocular
los medios directamente |
|
Micobacterias |
No
usar torundas |
|
Anaerobios |
Líquido
intraocular |
|
Parásitos |
Descartar
Acantamoeba spp. |
|
Chlamydia |
No
usar torundas de algodón |
|
Virus |
No
usar torundas de alginato cálcico |
5.
Consideraciones sobre las muestras gastrointestinales
|
Cultivo
|
Comentarios |
|
Bacterias |
Heces
Biopsia
gástrica: Helicobacter pylori
Torunda
rectal: Patógenos entéricos (especialmente Shigella
spp.) y N. gonorrhoeae. |
|
Hongos |
Jugo
gástrico, biopsia gástrica, biopsia esofágica |
|
Micobacterias |
Jugo
gástrico, biopsia gástrica, heces |
|
Parásitos |
Jugo
duodenal (Giardia spp. y Strongyloides stercoralis)
Biopsia
rectal: Entamoeba histolytica
Biopsias
intestino delgado: Giardia spp, Cryptosporidium y
Microsporidium spp. |
|
Virus |
Biopsia
esofágica (CMV y Herpes) y biopsia rectal (Herpes). |
6.-
Consideraciones sobre las muestras de orina
|
Cultivo
|
Volumen
(ml) |
Comentarios |
|
Bacterias |
0,5-1 |
No
válidas orinas de 24 horas |
|
Hongos |
>
20 |
No
válidas orinas de 24 horas |
|
Micobacterias |
>
20 |
No
válidas orinas de 24 horas |
|
Anaerobios |
1 |
Sólo
en orinas suprapúbicas |
|
Parásitos |
Orina
de 24 horas |
Schistosoma
haematobium, Trichomonas vaginalis, Onchocerca
volvulus |
|
Virus |
10-50 |
No
válidas orinas de 24 horas. Adenovirus y CMV |
7.-
Consideraciones sobre las muestras del tracto genital y enfermedades
de transmisión sexual
|
Cultivo
|
Muestra
recomendada |
|
Neisseria
gonorrhoeae |
Cervical,
uretral, anal |
|
Bacterias |
Cervical,
vaginal, secreción prostática |
|
Trichomonas
vaginalis |
Vaginal,
secreción prostática |
|
Hongos |
Anal,
vaginal, cervical |
|
Anaerobios |
Abscesos |
|
Virus
Herpes |
Úlceras
genitales |
|
Chlamydia
trachomatis |
Uretral,
vulva, cervical |
|
Treponema
pallidum |
Úlceras
genitales |
|
Ureaplasma
urealyticum |
Uretra,
secreción prostática |
|
Linfogranuloma
venéreo |
Rectal,
cervical, uretral, úlceras genitales |
|
Haemophilus
ducreyi |
Úlceras
y nódulos genitales |
8.-
Consideraciones sobre las muestras de piel y tejidos blandos
|
Cultivo
|
Comentarios |
|
Bacterias |
Usar
aspirados con jeringas o biopsias de tejido preferiblemente |
|
Hongos |
Dermatofitos,
levaduras, filamentosos y hongos dimórficos |
|
Micobacterias |
Mycobacterium
marinum, Mycobacterium fortuitum y Mycobacterium
chelonae |
|
Virus |
Virus
herpes simplex y varicella zoster |
|
Anaerobios |
Poco
comunes en infecciones superficiales, investigar sobre todo en
mordeduras y traumas |
4.1.
CRITERIOS DE ACEPTACIÓN Y RECHAZO DE LAS MUESTRAS/TOMA DE
DECISIONES
El laboratorio de microbiología debe determinar, una vez
recibida la muestra en el laboratorio, si esta cumple con los
requisitos para ser procesada. Estos requisitos incluyen entre otros,
una correcta identificación, tipo de muestra adecuada para la
petición, y condiciones adecuadas de transporte y conservación.
Es necesario que cada laboratorio establezca y difunda a los servicios
peticionarios sus propios requisitos de la aceptación de una
muestra para estudio microbiológico.
El
laboratorio de microbiología debe disponer también de un
sistema de registro de estas incidencias en el que figure la muestra
implicada, la persona que la recepciona, el tipo de incidencia, la
persona con la que se contacta del servicio solicitante y la resolución
de la incidencia (si la muestra no se procesa, si finalmente se decide
su procesamiento y en qué condiciones, etc.). Como sugerencia
se podía utilizar el formato del Anexo
1, Registro de incidencias en la recepción de las
muestras.
- Las
incidencias más frecuentes en la llegada de una muestra al
laboratorio de microbiología y las acciones a realizar(toma
de decisiones) ante cada caso son las siguientes:
- -
Muestra deficientemente identificada: no se aceptará
una muestra sin identificar, mal identificada o en la que no
coincidan la identificación del volante de petición
con la de la muestra. En cualquier caso se contactará con el
servicio peticionario haciéndole conocer la necesidad de que
procedan a la correcta identificación de la muestra. Si se
puede recoger otra muestra, se solicitará nuevamente.
Dependiendo de la importancia de la muestra, se puede optar a su
procesamiento antes de la correcta identificación con el
objeto de que no se deteriore la misma.
- -
Muestras derramadas: no se aceptarán muestras
claramente derramadas y se solicitará una nueva muestra. Se
procederá como en el caso anterior solicitando una nueva
muestra. En el caso de no ser posible la recogida de una nueva
muestra, desinfectar externamente el envase o trasvasar la muestra a
un contenedor estéril. En este caso, se indicará en el
informe que la muestra estaba derramada y que los resultados deben
ser interpretados con la debida precaución.
- -
Transporte/conservación inadecuados: si no se cumplen
los requisitos de la tabla 3,
se solicitará nueva muestra. En el caso de muestras que no se
puedan volver a recoger (por ejemplo: muestras quirúrgicas)
se puede optar por procesarlas informando por escrito al servicio
solicitante de la incidencia en la recogida/transporte de la muestra
y alertando de que los resultados obtenidos deben ser interpretados
con la precaución correspondiente. En el caso de que el
transporte deficiente invalide totalmente el estudio microbiológico
(por ejemplo, muestras en formol), no se aceptarán estas
muestras y se informará al servicio solicitante de la
inadecuación de la muestra.
4.2.
MANTENIMIENTO DE MUESTRAS TRAS EL PROCESAMIENTO
Es recomendable mantener las muestras conservadas (dependiendo de
la muestra/petición: a temperatura ambiente, en estufa de 35-37°C,
en nevera de 2-8°C, o congeladas a -20°C ó a -70°C)
un tiempo tras su procesamiento. El tiempo de conservación debe
ser aquel que garantice que un problema en el procesamiento o en la
interpretación de los cultivos pueda ser solucionado
recuperando la muestra para un nuevo procesamiento. El tiempo mínimo
oscila entre 1-3 días. Se recomienda guardar tanto las muestras
procesadas como las rechazadas (no procesadas).
4.3.
TRANSPORTE DE MUESTRAS POR SUPERFICIE Y POR VÍA AÉREA
Cada vez es más frecuente la realización de
procedimientos microbiológicos en lugares distantes al de la
toma de muestra. Aunque es obvio que las muestras biológicas,
sean infecciosas o no, deben estar correctamente empaquetadas y
etiquetadas para su transporte y envío, se ha hecho necesario
el desarrollo de legislaciones o guías específicas,
tanto a nivel nacional como internacional, debido al aumento del
transporte de muestras fuera de los recintos hospitalarios y entre los
distintos centros sanitarios. El objetivo de este desarrollo es el
reducir al mínimo posible el riesgo de accidentes.
4.3.1.
Transporte internacional aéreo
Las regulaciones internacionales para el transporte de material
infeccioso están basadas en las Recomendaciones del Comité
de Expertos de las Naciones Unidas para el Transporte de Artículos
Peligrosos. Estas recomendaciones están incluidas en las
regulaciones de la Unión Postal Universal (UPU), La Organización
Internacional de Aviación (OIAC) y la Asociación
Internacional de Transporte Aéreo (IATA), todas ellas
asesoradas por la OMS.
Actualmente,
las muestras se clasifican en sustancias infecciosas
(clasificadas dentro de uno de los cuatro grupos de riesgo definidos
por la OMS) y en muestras para diagnóstico.
- La
modificación en enero de 2003 de la clasificación de una
muestra como muestra para diagnóstico permite que las que
cumplan este criterio puedan ser clasificadas como ONU 3373 y
embaladas según las instrucciones de embalaje 650 del manual de
la IATA, con las siguientes excepciones:
- -
patógenos del grupo 4 de riesgo.
- -
Agentes identificados y patógenos nuevos o emergentes.
- -
Cultivos o "stocks" en grandes concentraciones.
- En
los tres casos anteriores los envíos deberán seguir
siendo clasificados bajo ONU 2814 ó 2900 y embalados de acuerdo
con la instrucción del embalaje 602 de IATA.
- Sistema
básico de embalaje (ver figura
1). Se compone de:
- Recipiente
primario estanco, a prueba de filtraciones, etiquetado, que
contiene la muestra. El recipiente debe envolverse en material
absorbente.
- Recipiente
secundario estanco, a prueba de filtraciones, que encierra y
protege el recipiente primario. Se pueden colocar varios recipientes
primarios envueltos en un recipiente secundario. Se debe usar
suficiente material absorbente para proteger a todos los recipientes
primarios y evitar choques entre ellos.
- Recipiente
externo de envío. El recipiente secundario se coloca en
un paquete de envío que protege al recipiente secundario y su
contenido de los elementos externos, tales como daño físico
y agua, mientras se encuentra en tránsito.
Figura
1.- Sistema básico de embalaje
Empaquetado
y etiquetado para el envío de sustancias infecciosas
Los
formularios con datos, cartas y otras informaciones de identificación
de la muestra deben colocarse pegados con cinta adhesiva en el
exterior del recipiente secundario.
Para
el transporte de sustancias infecciosas se debe utilizar el sistema de
embalaje básico con requerimientos específicos de
etiquetado y documentación.
En
los vuelos internacionales está estrictamente prohibido que los
pasajeros transporten sustancias infecciosas con ellos o en su
equipaje de mano. Igualmente está prohibida la utilización
del correo diplomático para el transporte de este tipo de
material.
- La
Guía para el transporte de sustancias infecciosas y especímenes
diagnósticos, publicada por la OMS en 1997, permite un
conocimiento detallado de los requerimientos específicos para
las diferentes situaciones que se pueden plantear ante el envío
de material biológico, algunos de los cuales se plantean a
continuación:
- 1.
Cantidad de sustancias infecciosas que pueden enviarse en un
paquete.
- 2.
Tipos de etiquetas de riesgo para sustancias infecciosas y para
microorganismos genéticamente modificados.
- 3.
Tipos de etiquetas de riesgo para microorganismos no infecciosos.
- 4.
Etiquetas para envío con dióxido de carbono (hielo
seco).
- 5.
Información que debe figurar en la etiqueta.
- 6.
Normas para envío con refrigerantes (dióxido de
carbono y nitrógeno líquido).
- 7.
Ejemplos de formato de los documentos de envío (los
originales pueden obtenerse de la compañía
transportadora).
4.3.2.
Transporte nacional y local por superficie
Otras
posibilidades de transporte de material biológico incluyen el
traslado de muestras dentro de un hospital o centro, de un centro de
salud a un hospital, de un laboratorio a otro, de un hospital a otro
dentro de la misma ciudad o a otra ciudad. Estos servicios de entrega
deben ser gestionados por el propio hospital, por el servicio de salud
o por cualquier organización de transportes o agencia que haya
sido autorizada.
Los
principios en los que se basa un transporte seguro son los mismos que
se aplican para el transporte internacional y la finalidad es que la
muestra no tenga ninguna posibilidad de salir del embalaje en las
circunstancias normales de transporte.
- Para
el embalaje y transporte de material biológico en estas
situaciones (transporte local por superficie) se recomienda un
embalaje tipo, como el envase homologado de la figura
1 y se deben tener en cuenta las siguientes indicaciones:
- 1.
Los recipientes de las muestras deben ser herméticos y a
prueba de fugas de líquidos.
- 2.
Si el recipiente es un tubo, debe estar cerrado herméticamente,
con tapa de rosca y colocado en una gradilla, de tal forma que
mantenga su posición vertical.
- 3.
Los recipientes con muestras y gradillas deben colocarse en una caja
resistente de metal o plástico y a prueba de fugas de líquido,
que contenga una cubierta segura y que cierre perfectamente.
- 4.
La caja donde se transportan los materiales deberá ser
asegurada firmemente en el vehículo de transporte.
- 5.
Cada caja de transporte deberá estar etiquetada de forma
adecuada y de acuerdo a su contenido.
- 6.
Los formularios con los datos de identificación de los especímenes
deben acompañar a cada caja de transporte.
- 7.
El vehículo de transporte deberá ir provisto de
material absorbente, desinfectantes, un contenedor para desechos a
prueba de fugas líquidas y guantes resistentes de uso múltiple.
El transporte de material biológico requiere una buena
colaboración entre el remitente, la compañía de
transporte y el destinatario, y cada uno debe asumir sus
responsabilidades para garantizar que el producto llega a su destino
oportunamente y en buenas condiciones.
5.
MEDIOS DE CULTIVO, REACTIVOS Y PRODUCTOS
Los
medios de cultivo y reactivos recomendados para el procesamiento de
muestras se detallan en la tabla 7.
Las condiciones de almacenamiento (temperatura, humedad, etc.) de los
reactivos y medios de cultivo utilizados deben ser establecidas,
controladas y revisadas (ver más detalles en el apartado 6).
Se
deben realizar, con periodicidad (semanal, mensual, trimestral, etc.)
establecida por el propio laboratorio, una revisión de los
materiales almacenados (cantidad, caducidades, estado general) con el
fin de comprobar el estado de los mismos, verificando su correcta
ubicación en los espacios identificados y definidos para ellos
en el almacén y su aptitud para el uso (ver como ejemplo de
formato el del Anexo 2,
Revisión de almacén).
6.
APARATOS Y MATERIAL
- Los
equipos habituales necesarios en el procesamiento de una muestra para
estudio microbiológico son:
- -
Estufas
- -
Neveras
- -
Congeladores
- -
Centrífugas
De
manera periódica (preferiblemente a diario) debe controlarse la
temperatura (y humedad/presión de CO2
si fuera necesario) de cada estufa/nevera/congelador al inicio de la
jornada de trabajo con un termómetro situado permanentemente en
el centro de cada equipo. El termómetro debe permitir la medida
de la temperatura máxima y mínima alcanzadas. Se anotará
en la hoja de registro de temperatura de cada aparato (como ejemplo se
propone la del Anexo 3,
Registro de temperatura) y en el caso de temperaturas mínima
o máxima fuera del rango de aceptación, anotar la
incidencia y realizar las acciones frente a esa variación.
Estas acciones, por un lado, deben asegurar los resultados derivados
de los cultivos y por otro corregir esa desviación.
- De
una manera genérica se sugieren los siguientes intervalos de
aceptación:
- ·
estufas de 35-37°C se acepta una mínima superior o igual
a 34°C y máxima inferior o igual a 37,5°C
- ·
estufas de 42°C se aceptan variaciones entre 40-43°C
- ·
estufas de 30°C se aceptan variaciones entre 28-32ºC Para
las neveras el intervalo de tolerancia que se acepta es generalmente
de 2º-8°C, aunque puede variar en función de los
reactivos que contengan.
Todos
los termómetros utilizados en la medida de temperaturas de los
aparatos se han de verificar mediante un termómetro de
referencia calibrado. Se introducirá el termómetro
utilizado para la medición de la temperatura y el termómetro
calibrado en el equipo correspondiente (nevera, congelador o estufa)
durante un mínimo de 15 minutos. Se aceptarán aquellos
termómetros cuyos desvíos no sobrepasen los límites
establecidos para cada uso concreto. La periodicidad de la verificación
de los termómetros con el termómetro calibrado debe ser
establecida por el propio laboratorio.
Existen
sistemas automáticos para el control de la temperatura,
humedad, presión de CO2,
etc., que controlan de una manera permanente (en intervalos de 15-20
minutos) los anteriores parámetros con gran fiabilidad y que
utilizan sondas de referencia verificadas por organismos certificados.
Estos sistemas alertan de los desvíos que se producen de una
manera más rápida que el control manual, controlan todos
los equipos del laboratorio y generan los informes de estos parámetros.
7.
PROCESAMIENTO
- 7.1.
RECEPCIÓN DE LA MUESTRA
- Cada
laboratorio de microbiología debe disponer de unas normas de
recepción y aceptación de muestras para diagnóstico
microbiológico. En el acto de la aceptación de muestras
por el laboratorio se deben comprobar los siguientes aspectos:
- -
La trazabilidad, es decir, la correspondencia de la muestra con el
volante de petición (con el paciente en definitiva). En la
petición se debe incluir:
- -
Nombre completo del paciente, número de historia o de la
seguridad social o DNI
- -
Servicio solicitante, nombre del médico solicitante
- -
Tipo de muestra (descripción completa y método de
obtención)
- -
Hora y/o fecha de recogida
- -
Enfermedad de base y motivo de la petición
- -
El correcto transporte de la muestra para la petición
solicitada
- -
La petición correcta de determinaciones microbiológicas
- 7.2.
PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA
- El
laboratorio someterá a la muestra a un procesamiento en función
de sus protocolos de trabajo y de la información que aporta el
servicio solicitante sobre la muestra y el paciente. Así el
procesamiento dependerá de varios factores:
- -
Petición del servicio solicitante
- -
Tipo de muestra/técnica de obtención
- -
Diagnóstico del paciente/enfermedad de base
- -
Motivo de petición
- -
Cualquier otra información aportada en el volante de la
petición
-
De una manera general podemos considerar estos tipos de procesamiento
de las muestras para microbiología de la siguiente forma:
- 7.2.1.-
Pretratamiento de la muestra
- 7.2.1.1.
Centrifugación
- -
Centrifugar todos los líquidos en volumen superior a 1ml a
2.500 rpm durante 15 minutos
- -
Centrifugar sangre a 3.500 rpm durante 3-5 minutos para detección
de antígenos y/o anticuerpos
- -
Otras técnicas de concentración específicas:
precipitación en etanol, ultracentrifugación
selectiva, etc.
- 7.2.1.2.
Homogeneización
- *
7.2.1.2.1 Mediante hoja de bisturí
- -
Traspasar la muestra a una placa de Petri estéril. Con ayuda
de una hoja de bisturí desmenuzar el tejido hasta obtener una
consistencia homogénea.
- -
Traspasar la muestra homogenizada a un contenedor estéril con
ayuda de una pipeta Pasteur.
- *
7.2.1.2.2. Mediante mortero
- -
Traspasar la muestra al interior de un mortero estéril y añadir
1-2 ml de caldo de cultivo.
- -
Con ayuda de la mano del mortero triturar la muestra mediante
movimientos rotatorios.
- -
Traspasar la muestra utilizando una pipeta Pasteur estéril a
un contendor estéril.
- *
7.2.1.2.3. Mediante Stomacher
- -
Colocar la muestra en el interior de una bolsa de Stomacher y añadir
1-2 ml de caldo de cultivo - Colocar la bolsa en el interior del
Stomacher, dejando unos centímetros de la bolsa sobresalir
sobre la tapa del Stomacher. - Cerrar la tapa y conectar el
Stomacher durante 1 a 5 minutos. - Desconectar el Stomacher, extraer
la bolsa y traspasar su contenido a un contenedor estéril.
Las muestras que se procesen para hongos no se homogenizan sino que
se deben cortar en pequeños trozos con la ayuda del bisturí
y se inoculan directamente sobre los medios de hongos con objeto de
evitar que determinados hongos no septados sean inviables.
- 7.2.2.-
Preparación de extensiones
- 7.2.2.1.
Mediante impronta: Piezas de tejido
- -
Colocar el tejido en una placa de Petri y cortar una porción
con la ayuda de una hoja de bisturí
- -
Con unas pinzas, tomar la pieza cortada y realizar impresiones por
la superficie del corte sobre un portaobjetos
- 7.2.2.2.
Extensiones finas: material muy purulento
- -
Tomar una porción de la muestra y colocarla sobre un
portaobjetos
- -
Colocar otro portaobjetos sobre la muestra y presionar los dos
portaobjetos
- -
Desplazar el portaobjetos superior sobre el que contiene la muestra
hasta separarlos
- -
Repetir este último paso hasta conseguir una extensión
fina
- 7.2.2.3.
Líquidos
- -
Depositar una gota de líquido sobre un portaobjetos y dejar
secar
- -
Citocentrifugar unas gotas de líquido 5-10 min. a velocidad
media
- 7.2.2.4.
Muestras en torunda
- -
Colocar la torunda sobre un portaobjetos
- -
Añadir sobre la torunda una pequeña cantidad de caldo
de cultivo
- -
Realizar movimientos rotatorios, exprimiendo la torunda sobre el
portaobjetos
- 7.2.3.
Inoculación de la muestra en los medios de cultivo: selección
de los medios: (ver tabla 7)
- 7.2.3.1.
Piezas no triturables
- -
Si la pieza es pequeña, introducirla en un caldo de cultivo e
incubar 24 horas tras lo cual se harán subcultivos a los
medios necesarios.
- -
Si la muestra es grande, añadir al contenedor en el que se
recibe 10-20 ml de caldo de enriquecimiento e incubar
inmediatamente. Tras 24 horas realizar subcultivos a los medios
necesarios.
- 7.2.3.2.
Muestras recibidas en jeringas o tubos estériles
- -
Inocular 2 ó 3 gotas de la muestra en uno de los cuadrantes
de la placa de Petri
- -
Realizar estriamientos de la muestra mediante un asa estéril
por todos los cuadrantes de la placa
- -
Inocular unas gotas de la muestra en un caldo de cultivo
- 7.2.3.3.
Muestras recibidas en torundas
- -
Hacer rotar la torunda varias veces en uno de los cuadrantes de la
placa
- -
Con un asa estéril realizar estrías desde la zona de
la descarga por el resto de los cuadrantes de las placas.
- -
Introducir la torunda en un caldo de cultivo y exprimirla bien
mediante movimientos rotatorios sobre las pares del tubo. Cortar la
parte superior y mantener en incubación una porción de
la misma en el interior del tubo con caldo de cultivo.
- 7.2.3.4.
Técnica de Maki para cultivo de catéteres
intravasculares
- -
Con la ayuda de una asa o de unas pinzas estériles extraer el
catéter de su envase.
- -
Si mide más de 2-4 cm, cortarlo con un bisturí hasta
esa longitud.
- -
Depositarlo en una placa de agar sangre y rodar desde un extremo al
otro de la placa 3-4 veces
- 7.2.3.5.
Cultivos semicuantitativos (conexión catéteres/piel
pericatéter)
- -
Extender la muestra con la torunda seca por toda la placa de agar
sangre como si de un cultivo cuantitativo de orina se tratara
- 7.2.3.6.
Cultivos cuantitativos (orina, broncoaspirados, secreciones
traqueales, lavados broncoalveolares)
- -
En el caso de muestras respiratorias fluídas, agitar en vórtex
durante unos segundos. Si no se consigue una buena homogeneización,
añadir suero salino y agitar en vórtex de nuevo.
Indicar en los medios de cultivo la dilución aproximada
realizada con el suero salino. En el caso de la orina pasar
directamente al siguiente paso.
- -
Esterilizar un asa calibrada de volumen adecuado (por ejemplo de
0,0025 mL) con el incinerador o mechero.
- -
Enfriar el asa e inocular la muestra con la ayuda del asa en los
medios adecuados, realizando un cultivo cuantitativo por toda la
superficie de la placa.
Tabla
7.- Recomendaciones de medios de cultivo y tinción de Gram para
muestras microbiológicas seleccionadas
|
Muestras/Microorganismo |
Gram |
AS |
ACH |
MCK |
Tio/BHI |
Otros |
|
Biopsias |
X |
X |
X |
X |
X |
Medios
anaerobios¹ |
|
Biopsias
(intestinal, colon, rectal) |
|
|
|
|
|
C.difficile
Enteropatógenos
|
|
Biopsias
gástricas |
X |
|
|
|
|
Helicobacter
pylori |
|
Catéter
vascular |
|
X |
|
|
|
|
|
Conexiones/Piel
pericatéter |
|
X |
|
|
|
|
|
Genitales |
|
|
|
|
|
|
|
Rectal
|
|
X |
|
|
|
S.
agalactiae |
|
Uretral
|
X |
|
X |
|
|
Thayer
Martin |
|
Cervical
|
|
X |
X |
|
|
Thayer
Martin |
|
Secreción
prostática |
|
X |
X |
X |
X |
|
|
Vaginal
|
|
X |
|
|
|
S.
agalactiae |
|
Heces |
|
|
|
|
|
Caldo
Selenito
SS
o similar
Campylobacer
selectivo
Sangre
ampicilina |
|
Heridas
profundas, mordeduras, quemaduras, úlceras, abscesos |
X
|
X |
X |
X |
X |
Medios
anaerobios¹ |
|
Heridas
superficiales |
X |
X |
X |
X |
X |
|
|
Jugo
gástrico |
|
X |
X |
X |
X |
Medios
anaerobios¹ |
|
Líquidos
estériles |
|
|
|
|
|
|
|
L.
ascítico, peritoneal, pericárdico, sinovial |
X |
X |
X |
X |
X |
Medios
anaerobios¹ |
|
L.
pleural |
X |
X |
X |
X |
X |
BCYE
Medios
anaerobios¹ |
|
Líquido
cefalorraquídeo |
X |
X |
X |
|
X |
|
|
Ocular |
|
|
|
|
|
|
|
Exudado
conjuntival |
|
X |
X |
|
|
|
|
L.
intraocular |
X |
X |
X |
X |
X |
Medios
anaerobios¹ |
|
Oído
externo |
|
X |
X |
X |
|
|
|
Timpanocentesis |
X |
X |
X |
X |
X |
|
|
Orina
(micción, sondaje) |
|
X |
|
X |
|
Agar
Cled |
|
Orina
suprapúbica |
X |
X |
X |
X |
|
Medios
anaerobios¹ |
|
Tracto
respiratorio inferior |
|
|
|
|
|
|
|
Broncoaspirado
|
X |
X |
X |
X |
|
BCYE |
|
Cepillado
bronquial con telescopado |
X |
X |
X |
X |
|
BCYE
Medios
anaerobios1 |
|
Lavado
broncoalveolar |
X |
X |
X |
X |
|
BCYE |
|
Esputo
|
X |
X |
X |
X |
|
|
|
Tracto
respiratorio superior |
|
|
|
|
|
|
|
Aspirado
sinusal |
X |
X |
X |
X |
X |
Medios
anaerobios¹ |
|
Faríngeo
|
|
X |
|
|
|
Alternativa
CNA |
|
Nasal
|
|
X |
|
|
|
Agar
Manitol sal |
|
Clostridium
difficile |
|
|
|
|
|
CCFA |
|
E.coli
O157H7 |
|
|
|
|
|
Sorbitol-MCK |
|
Bordetella
pertussis |
|
|
|
|
|
Bordet
Gengou
IFD
si no cultivo |
|
Helicobacter
pylori |
|
X |
|
|
|
Agar
Helicobacter
Thayer
Martin
Agar
Brucella |
|
Legionella |
|
|
|
|
|
BYCE |
|
Neisseria
gonorrhoeae |
|
|
X |
|
|
Thayer
Martin |
|
Streptococcus
agalactiae |
|
X |
|
|
|
Todd-Hewitt
Agar
Granada |
|
Vibrio
|
|
|
|
|
|
TCBS |
|
Yersinia
|
|
|
|
|
|
CIN |
¹:
medios anaerobios: agar sangre para anaerobios (Brucella
agar), agar feniletanol para anaerobios, agar sangre
lacada-vancomicina-kanamicina (ASKVL), agar Bacteroides bilis
esculina (BBE) Abreviaturas:
AS: Agar sangre; ACH: Agar chocolate; MCK: Agar MacConkey; Tio/BHI:
Caldo tioglicolato ó infusión cerebro-corazón de
buey; BCYE: agar enriquecido para cultivo de Legionella; CNA:
agar sangre colistina-ácido nalidíxico; CCFA: agar
cicloserina-cefoxitina-fructosa-yema de huevo; TCBS: agar
tiosulfato-citrato-sales biliares-sacarosa; CIN: agar
cefsulodina-irgasán-novobiocina
- 7.2.4.
Incubación
- 7.2.4.1.
Temperatura
- -
La mayoría de los cultivos bacterianos se incuban a 35-37ºC
- -
El aislamiento de Campylobacter spp. de heces requiere una
temperatura de incubación de 42ºC
- -
La mayoría de los cultivos para hongos se incuban a 30°C
- 7.2.4.2.
Atmósferas de incubación
- -
Aerobiosis
- -
Atmósfera enriquecida con 5-7% de CO2
- -
Atmósfera microaerofílica para el aislamiento de Campylobacter:
5% de O2,
10% CO2
y 85% de N2.
- -
Atmósfera de anaerobiosis
Cada
laboratorio debe realizar una vigilancia de la calidad de los medios
de cultivo que utiliza, tanto de los preparados en el propio
laboratorio (apariencia, crecimiento/inhibición, esterilidad)
como de los que se adquieran comercialmente.
El
laboratorio debe solicitar al proveedor de medios de cultivo los
certificados de los controles de calidad donde deben estar incluídas
las características físicas y químicas que
definen al medio de cultivo. Esos certificados deben conservarse en el
laboratorio. Asimismo, se deberán realizar controles de calidad
a los medios adquiridos comercialmente. El propio laboratorio debe
elegir tanto la periodicidad como la selección de los medios a
los que realizar el control de calidad en función del tipo de
medios que utilice, la variedad y los datos históricos de la
conformidad de los controles realizados por el laboratorio con las
características que el proveedor facilite: un medio estable y
que no haya ocasionado problemas de crecimiento según registros
previos se debe controlar menos que uno que sea menos estable y haya
ocasionado problemas en su uso. El laboratorio debe generar registros
de este control de medios adquiridos de proveedores y conservar estos
registros para poder evaluar los medios y reconsiderar permanentemente
el control de calidad de los mismos. Como ejemplo de formato para el
registro de control de medios adquiridos comercialmente se propone el
formato del Anexo 4,
Control de medios preparados. Con este control no sólo se
evalúa la conformidad del laboratorio con los medios que
adquiere ya preparados sino que también se evalúan las
condiciones de procesamiento, estufas y atmósferas utilizadas.
Para
el control de los medios se deben utilizar preferentemente cepas de
colección (ATCC, CECT u otras colecciones) pero en el caso de
no tener acceso a estas cepas se podrán utilizar cepas aisladas
en el propio laboratorio con características perfectamente
definidas.
8.
OBTENCIÓN Y EXPRESIÓN DE RESULTADOS
Las
incidencias surgidas en la recogida de la muestra para estudio
microbiológico se deben informar lo antes posible al servicio
solicitante con el objeto de que la resolución sea inmediata.
Cuando la información sea telefónica, los interlocutores
deben quedar identificados, y esta información debe seguirse
siempre de un informe escrito a la mayor brevedad posible.
9.
RESPONSABILIDADES
El
proceso de recogida de la muestra es responsabilidad del servicio
solicitante o del laboratorio de microbiología si se realiza en
él la toma de la muestra.
La información sobre las normas de recogida, transporte y
conservación y su distribución a los servicios
solicitantes es responsabilidad del laboratorio de microbiología.
El procesamiento de la muestra es responsabilidad del laboratorio
de microbiología.
10.
ANOTACIONES AL PROCEDIMIENTO
Todo
el personal del laboratorio de microbiología deberá
conocer las normas generales de seguridad. El laboratorio de
microbiología debe establecer las normas de seguridad en un
Manual de Seguridad y distribuirlo a todo el personal que trabaje en
el laboratorio. Para más información, se puede consultar
el procedimiento número 10 de la SEIMC sobre Seguridad en el
Laboratorio de Microbiología en el que de detallan los niveles
de contención necesarios para cada microorganismo.
11.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Todas
las limitaciones del proceso de recogida, transporte, conservación
y procesamiento de muestras han sido expuestas a lo largo del
documento. Estas limitaciones deben quedar registradas con el objeto
de que puedan ser medidas periódicamente y de poder disponer de
datos de su evolución correspondiente. Cada laboratorio de
microbiología debe establecer indicadores de los procesos de
recogida, transporte, conservación y procesamiento de muestras
con el objeto de llevar a cabo las acciones correspondientes cuando
estos indicadores esten fuera del rango de los límites
establecidos.
12.
BIBLIOGRAFÍA
1.
Enmiendas propuestas por Portugal y España a los anexos A y B
del Acuerdo Europeo sobre Transporte Internacional de Mercancías
Peligrosas por carretera (ADR), hecho en Ginebra el 30 de septiembre
de 1957. Suplemento del BOE nº 70 de 22 de marzo de 2002. Fascículo
primero, pp. 178-184.
2.
Fleming, D.O. D.L. Hunt. 2000. Biological safety: principles and
practices. 3rd
ed. American Society for Microbiology. Washington, D.C.
3.
Isenberg, H. 1992. Clinical Microbiology Procedures Handbook. American
Society for Microbiology. Washington, D.C.
4.
ISO 9001:2000. Sistema de gestión de la calidad. Requisitos.
5.
ISO 9001:2000. Sistema de gestión de la calidad. Fundamentos y
vocabulario.
6.
ISO 9004:2000. Sistema de gestión de la calidad. Directrices
para la mejora del desempeño.
7.
Mandell, G., J. Bennett, and R. Dolin. 2000. Principles and practice
of infectious diseases, 5th
ed. Churchill Livingston, New York.
8.
Miller, J.L. 1996. A guide to specimen management in clinical
microbiology. American Society for Microbiology. Washington, D.C.
9.
Murray, P.R. 1998. Pocket guide to clinical microbiology. 2nd
ed. American Society for Microbiology. Washington, D.C.
10.
Murray, P.R., E.J. Baron, M.A. Pfaller, F.C. Tenover, and R.H. Yolken.
1999. Manual of Clinical Microbiology, 7th
ed. American Society for Microbiology. Washington, D.C.
11.
Orden de 4 de diciembre de 2001 por la que se actualizan las
instrucciones técnicas para el transporte sin riesgos de
mercancías peligrosas por vía aérea. Suplemento
del BOE nº 299. de 14 de diciembre de 2001. Fascículo
primero. pp. 68-71.
ANEXO
1.- Registro de incidencias en la recepción de las muestras
Fecha:___/___/______
Nº
Muestra |
Tipo
Muestra |
Servicio
Peticinario |
Persona
que
detecta
incidencia |
INCIDENCIA¹ |
CONTACTO
SERVICIO
PETICIONARIO |
RESOLUCIÓN: |
NO
PROCESAR
POR¹: |
INTERPRETAR
CON
PRECAUCIÓN
POR¹: |
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|
OBSERVACIONES:
Firma
Facultativo |
¹Describir
la incidencia: derramada; transporte inadecuado; mal identificada; no
especificada petición; no procede petición; falta
muestra, etc.
Registro
de incidencias en la recepción de las muestras.
ANEXO
2.- Revisión de almacén
REVISIÓN
REALIZADA
|
DESCRIPCIÓN
DE LAS INCIDENCIAS DETECTADAS
| Fecha: |
Firma
(Responsable de Almacén) |
|
RESOLUCIÓN
(ACCIONES EMPRENDIDAS)
|
DESCRIPCIÓN
DE LAS INCIDENCIAS DETECTADAS
|
Registro
de revisión de almacén.
ANEXO
3.- Registro de temperatura
| APARATO
Nº: |
LOCALIZACIÓN:
|
| DESCRIPCIÓN:
|
|
| MARCA: |
MODELO |
| Nº
SERIE: |
|
| CASA
COMERCIAL: |
PROPIETARIO: |
| FECHA
DE COMPRA: |
|
REGISTRO
DE TEMPERATURA
Anótese
diariamente la temperatura y la fecha del control, así como el
nombre legible de la persona que lo realizó.
No olviden controlar las temperaturas máxima y mínima
alcanzadas y anotar cualquier incidencia observada.
| FECHA |
TEMP |
INCIDENCIA |
FIRMA
LEGIBLE |
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|
Registro
de temperatura.
| ANEXO
4.- Control de medios preparados |
| Control
de (medio controlado) |
| Cepa
utilizada: |
|
| Resultado
esperado: |
|
| Mes
______ Año ________ |
| Fecha |
Crecimiento
(Si/No) |
Aspecto
colonia/
Observaciones |
Valoración:
Correcta=1
Incorrecta=2 |
Nombre/
Firma legible |
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|
|
|
|
Control
de medios preparados. |
rocedimientos
en Microbiología Clínica