rocedimientos en Microbiología Clínica Recomendaciones de la Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica Editores: Emilia Cercenado y Rafael Cantón

Coordinador: José L. Pérez Sáenz Autores: Concepción Gimeno Cardona David Navarro Ortega María de Oña Navarro José L. Pérez Sáenz

ÍNDICE DEL DOCUMENTO CIENTÍFICO: 1. Introducción 2. Virus del herpes simple 2.1. Importancia clínica 2.2.Diagnóstico microbiológico 2.2.1. Aspectos preanalíticos: obtención y transporte de las muestras 2.2.2. Aspectos analíticos: métodos diagnósticos 2.2.3. Diagnóstico serológico 2.2.4. Detección de antígeno vírico 2.2.5. Detección de genoma vírico 2.2.6. Cultivos celulares 2.3. Principales indicaciones de las pruebas diagnóticas 2.4. Estudios de sensibilidad a los antiviricos 3. Virus varicela-zóster 3.1. Importancia clínica 3.2. Diagnóstico microbiólogico 3.2.1. Aspectos preanalíticos: obtención y transporte de las muestras 3.2.2. Respuesta inmune y diagnóstico serológico 3.2.3. Detección de antígeno vírico en muestras clínicas 3.2.4. Detección del genoma vírico 3.2.5. Cultivo celular 3.3. Principales indicaciones de las pruebas diagnosticas 3.4. Resistencia a los antiviricos 4. Citomegalovirus humano 4.1. Importancia clínica 4.2. Diagnóstico microbiologico 4.2.1. Conceptos y definiciones 4.2.2. Aspectos preanalíticos: obtención y transporte de las muestras 4.2.3. Respuesta inmune y diagnóstico serológico 4.2.4. Métodos basados en el cultivo 4.2.5. Diagnóstico histológico y detección de antígenos en tejidos 4.2.6. Prueba de antigenemia de CMV 4.2.7. Métodos moleculares cualitativos 4.2.8. Métodos moleculares cuantitativos: carga vírica 4.3. Principales indicadores de las pruebas diagnósticas 4.3.1. Utilidad real de las técnicas serológicas 4.3.2. Indicaciones de los métodos basados en el cultivo 4.3.3. Utilidad de las técnicas histológicas y de detección de antígenos en tejidos 4.3.4. Aplicación práctica de la prueba de antigenemia 4.3.5. Utilidad de las técnicas moleculares cualitativas 4.3.6. Pruebas moleculares cuantitativas 4.4. Diagnóstico del cmv en diversas situaciones clínicas 4.4.1. Problemas diagnósticos y pronósticos en la gestación 4.4.2. Diagnóstico de la infección congénita en el recién nacido 4.4.3. Diagnóstico y pronóstico en el inmunodeprimido: transplante de órganos 4.5. resistencia a los antiviricos y pruebas in vitro 4.5.1. Métodos fenotípicos de sensibilidad a los antivíricos 4.5.2. Métodos genotípicos de detección de la resistencia 4.5.3. Cuándo, cómo y qué métodos podemos aplicar en la práctica clínica 5. Herpesvirus humano 6 5.1. Importancia clínica 5.2. Diagnóstico microbiologico 5.2.1. Aspectos preanalíticos: obtención y transporte de las muestras 5.2.2. Diagnóstico directo por cultivo 5.2.3. Detección de antígeno en sangre (antigenemia) 5.2.4. Detección de ADN del HVH6 (PCR) 5.2.5. Respuesta inmune frente al HVH6: diagnóstico serológico 5.3. Diagnóstico del hvh6 en los distintos grupos de pacientes 5.3.1. Infección primaria 5.3.2. Infección en los pacientes transplantados 5.4. Tratamiento y resistencia a los antivíricos 6. Herpesvirus humano 7 6.1. Importancia clínica 6.2. Diagnóstico microbiológico 6.2.1. Aspectos preanalíticos: obtención y transporte de las muestras 6.2.2. Métodos de cultivo 6.2.3. Detección de antígeno en sangre (antigenemia) 6.2.4. Detección de ácidos nucleicos 6.2.5. Diagnóstico indirecto o serológico 6.3. Terapéutica antivirica de las infecciones por el hvh7 7. Virus de Epstein-Barr 7.1. Significación clinica 7.2. Diagnóstico microbiologico: generalidades 7.3. Diagnóstico de la patología no tumoral en el paciente inmunocompetente 7.3.1. Diagnóstico de la mononucleosis infecciosa 7.3.2. Diagnóstico de la enfermedad crónica activa 7.4. Diagnóstico de la patología no tumoral en el paciente inmunodeprimido 7.4.1. Diagnóstico de la infección primaria 7.4.2. Diagnóstico de la leucoplasia oral vellosa 7.5. Diagnóstico de la patología tumoral vinculada con el Veb 7.5.1. Detección de proteínas del VEB en el tejido tumoral 7.5.2. Detección de ADN y ARNm del VEB en el tejido tumoral 7.5.3. Análisis de la carga vírica del VEB en la sangre periférica 8. Herpesvirus humano 8 8.1. Importancia clínica 8.2. Diagnóstico microbiologico 8.2.1. Diagnóstico directo: muestras y métodos 8.2.2. Detección mediante PCR 8.2.3. Otros métodos de diagnóstico directo 8.2.4. Diagnóstico indirecto o serológico: generalidades 8.2.5. Detección de anticuerpos frente a antígenos de fase latente 8.2.6. Detección de anticuerpos frente a antígenos de ciclo lítico 8.2.7. Resumen: selección del antígeno a utilizar en los ensayos serológicos 8.3. Interpretación de los resultados 8.3.1. Condicionantes del diagnóstico directo 8.3.2. Interpretación de los resultados serológicos 8.3.3. Relación entre los cuadros clínicos asociados al HVH8 y la inmunosupresión en los pacientes infectados por el VIH y en los traNsplantados 8.4. Sensibilidad y tratamiento antivírico 9. Bibliografía 9.1. Virus del herpes simple 9.2. Virus varicela-zóster 9.3. Citomegalovirus 9.4. Herpesvirus humanos 6 y 7 9.5. Virus de Epstein-Barr 9.6. Herpesvirus humano 8 DOCUMENTOS TÉCNICOS: 1. Aislamiento de los virus del herpes simple en cultivo convencional en tubo. 2. Método simplificado para determinar la sensibilidad de los virus del herpes simple a aciclovir. 3. Detección directa del virus varicela-zóster en lesiones cutáneas mediante inmunofluorescencia. 4. Detección de antígenos en cultivo (shell vial) para el citomegalovirus y para otros virus. 5. Prueba de antigenemia pp65 de citomegalovirus. 6. Prueba de la avidez IgG anti-VCA del virus de Epstein-Barr 7. Detección de ADN de Herpesviridae en LCR y otras muestras mediante PCR múltiple.